LOC339524基因介导脂多糖诱导小鼠小胶质bv2细胞系炎症因子的表达
LOC339524 gene mediates lipopolysaccharide-induced expression of inflammatory cytokines in mouse microglia bv2 cell line
摘要目的 研究LOC339524基因对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的小鼠小胶质by2细胞系炎症因子表达的影响.方法 100 ng/mL LPS处理by2细胞3、6、9、12 h用于摸索最佳炎症反应时间;10、100、1 000、10 000 ng/mL LPS处理bv2细胞和100 ng/mL LPS处理by2细胞3、6、9、12 h用于研究LOC339524蛋白表达变化;siRNA沉默LOC339524和慢病毒转染构建过表达LOC339524的细胞株后加LPS处理用于检测炎症因子变化;qPCR检测TNF-α、IL-6和LOC339524 mRNA水平变化,Westernblot检测TNF-α、IL-6和LOC339524蛋白水平变化.结果 与Oh相比,LPS处理不同时间均可使TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05),12 h两者表达一致,选择12 h进行后续炎症反应研究;与0 ng/mL LPS处理组相比,不同浓度LPS均可诱导LOC339524蛋白的表达增加(P<0.05),100 ng/mL LPS处理后呈时间依赖性增加(P<0.05).LPS处理12 h后,siRNA组较无关片段组,TNF-α和IL-6 mRNA和蛋白表达显著上调(P<0.05),反之,过表达组较正常组TNF-α和IL-6 mRNA和蛋白表达显著下调(P<0.05).结论 LOC339524基因介导了脂多糖诱导by2细胞的炎症反应.
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