吴茱萸碱通过MAPK信号通路抑制人胃癌细胞的体外实验研究

Anti-tumor mechanism of evodiamine on gastric cancer cells in vitro through MAPK signaling pathway

摘要目的探讨吴茱萸碱通过丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路对人胃癌细胞的抑制作用.方法应用MTT法对SGC-7901细胞活性进行评定.以8、16、32 μmol/L吴茱萸碱作用胃癌SGC-7901细胞(记为A1组,A2组,A3组),另设置相同浓度吴茱萸碱处理后的细胞,加入p38抑制剂(记为B1组,B2组,B3组),对照组用细胞培养液处理作为空白对照.Annexin V-FITC/PI法观察细胞凋亡,PI染色法观察细胞周期,Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、cleaved-caspase-3,划痕愈合实验评价细胞迁移抑制情况,蛋白质印迹法检测c-dc2、cdc25C、cyclin B1及p-ERK、p-p38蛋白水平表达.结果吴茱萸碱能够阻碍SGC-7901细胞增殖,细胞活性随着浓度和时间的增加而降低,24、48 h的IC50分别是16.78、7.28 μmol/L.与对照组(0.06％)比较,A组SGC-7901细胞凋亡比例(18.72％、31.08％、52.17％)增加,G2/M细胞周期阻滞,与A组比较,B组SGC-7901细胞凋亡比例减少,G2/M细胞周期阻滞减弱,G2/M期调控蛋白cdc2、cdc25C、cyclin B1水平下调(P均＜0.05).划痕愈合实验表明SGC-7901细胞的细胞划痕愈合率伴随吴茱萸碱浓度升高而降低;与A组(59.13％、23.15％、18.31％)比较,B组细胞划痕愈合率(63.17％、55.27％、34.08％)升高(P＜0.05).Western blot结果表明吴茱萸碱处理Bcl-2、cleaved-caspase-3水平上调,SGC-7901细胞MAPK通路蛋白p-ERK水平下调,p-p38表达水平上调(P＜0.05).与A组比较,B组cdc2、cdc25C、cyclin B1表达上调,Bcl-2、cleaved-caspase-3水平显著下降,MAPK通路蛋白p-ERK水平上调,p-p38水平下调(P＜0.05).结论吴茱萸碱对胃癌细胞有抑制作用,其机制是通过MAPK信号通路下调p-p38蛋白、上调凋亡蛋白实现.