摘要目的 探索不同年龄组小鼠骨来源的间充质干细胞(bone derived mesenchymal stem cells,BMSCs)衰老相关的生物学特性及骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)诱导成骨分化能力的改变.方法 将8只C57BL/6J小鼠分为青年组(4周龄,体质量约为10～15 g,n=4)和老年组(12月龄,体质量约为20 g～25 g,n=4),每组雌雄各半.分别从2组小鼠的整骨中提取间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),通过流式细胞术鉴定2组BMSCs的表面标志物,通过β-半乳糖苷酶染色比较2组BMSCs的衰老程度,通过MTT和EdU掺入实验比较2组BMSCs的增殖及自我更新能力.通过Western blot分析2组BMSCs中周期蛋白CyclinD1、P21的表达情况.采用ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR评估2组BMSCs的体外成骨分化能力,使用RNA-seq分析比较2组BMSCs经BMP2诱导后的差异基因表达,并用流式分析验证测序结果.结果 流式细胞术分析结果显示,分离培养的小鼠BMSCs符合间充质干细胞判定标准.β-半乳糖苷酶染色结果显示,老年组BMSCs的衰老水平显著高于青年组(P＜0.05).而MTT和EdU掺入实验结果表明,老年组BMSCs的细胞活力和增殖能力显著低于青年组(P＜0.05).Western blot结果显示,与青年组比较,老年组BMSCs的细胞周期蛋白CyclinD1表达水平较低,而细胞周期阻抑因子P21蛋白表达水平显著增高(P＜0.05).ALP染色和茜素红S染色及RT-qPCR检测结果显示,BMP2诱导后青年组BMSCs的成骨分化能力显著高于老年组(P＜0.05).RNA-seq 结果显示,BMP2 诱导后,整合素 αV 重组蛋白(cluster of differentiation 51,CD51)在青年组和老年组中的表达趋势相反.而流式细胞术分析结果显示,青年组CD51+细胞在CD45-细胞中占比明显高于老年组(P＜0.01).结论 老年组BMSCs中CD51+细胞在CD45-细胞中占比下降与CD51+细胞对BMP2的成骨诱导响应性下降密切相关.