换一批EP联合方案耐药小细胞肺癌细胞株的构建及机制探讨
Construction and mechanism of a small cell lung cancer cell line resistant to EP chemotherapy scheme
摘要目的 构建依托泊苷(etoposide,VP-16)联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗方案(EP联合方案)耐药的小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞株H446/EP,并进行耐药特性鉴定及机制探讨.方法 以药物浓度递增法,使用VP-16联合DDP处理NCI-H446细胞构建H446/EP细胞株.以H446/EP与NCI-H446细胞为研究对象,MTT法检测细胞活力,计算H446/EP细胞耐药指数(resistance index,RI);细胞克隆实验、Incucyte细胞增殖(无标记)法检测细胞增殖能力;转录组学测序后,对2种细胞差异表达基因进行富集分析;Western blot检测细胞耐药、DNA损伤修复(repair of DNA damage,DDR)、自噬标志分子的蛋白表达量.结果 MTT结果显示,H446/EP细胞对VP-16、DDP与DOX的RI分别为6.14、3.43与1.96;细胞克隆实验与Incucyte细胞增殖(无标记)法结果显示,H446/EP细胞增殖能力显著高于NCI-H446细胞(P<0.01);转录组学测序、通路富集分析显示差异表达基因在肿瘤化疗耐药、DDR、自噬相关通路富集;Western blot结果显示,相比NCI-H446细胞,H446/EP细胞MRP1、BCRP、RAD51、γ-H2AX及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达量显著升高,p62蛋白表达量显著降低(P<0.05).结论 EP联合方案耐药的SCLC细胞株H446/EP构建成功,增殖能力增强;细胞外排转运蛋白表达量增加、DDR及自噬水平升高可能是SCLC对EP联合方案产生耐药的机制.
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10.16016/j.2097-0927.202402065
发布时间
2024-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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