摘要目的 探究线粒体自噬在胰腺癌恶病质肌肉萎缩中的作用及其潜在机制.方法 采用随机数字表法将8周龄雄性C57BL/6J小鼠(n=6,体质量20～30 g)分为对照组(n=3,胰腺原位注射生理盐水)和恶病质组(n=3,胰腺原位注射KPC1199细胞,建立胰腺癌模型).建模完成后,采集2组小鼠的腓肠肌组织,使用透射电镜观察线粒体超微结构;通过Western blot检测线粒体呼吸链复合体Ⅰ-Ⅳ及自噬相关蛋白的表达,免疫荧光染色观察腓肠肌中线粒体溶酶体共定位.细胞实验中,将C2C12成肌细胞诱导分化为肌管后,分为对照组(常规培养)和恶病质组(通过共培养小室与KPC1199细胞共培养48 h).通过免疫荧光染色及Western blot分别观察线粒体溶酶体共定位和线粒体自噬相关蛋白的表达.在共培养体系中加入线粒体分裂抑制剂,通过免疫荧光染色评估肌管直径.结果 与对照组比较,恶病质组小鼠腓肠肌线粒体肿胀、嵴减少,线粒体溶酶体共定位显著增多.Western blot检测显示,与对照组比较,线粒体呼吸链复合体Ⅰ(1.00±0.04 vs 0.51±0.04,P<0.05)、复合体Ⅱ(1.00±0.13 vs 0.73±0.15,P<0.05)、复合体Ⅲ(1.00±0.20 vs 0.64±0.01,P<0.05)、复合体Ⅳ(1.06±0.06 vs 0.65±0.02,P<0.05)和PGC-1α(1.00±0.03 vs 0.62±0.06,P<0.05)表达降低,线粒体自噬标志物LC3-Ⅰ/Ⅱ(1.00±0.14 vs 1.65±0.25,P<0.05)、PINK1(1.00±0.11 vs 1.51±0.05,P<0.05)和BNIP3(1.00±0.22 vs 2.02±0.10,P<0.05)表达升高.在C2C12肌管模型中,肿瘤细胞共培养组线粒体溶酶体共定位较对照组增多,线粒体自噬相关蛋白表达增高,变化趋势与动物模型一致.加入20 μmol/L线粒体分裂抑制剂干预后,肌管直径从(220.6±35.5)μm增至(315.0±39.1)μm(R2=0.666 5,P<0.05).结论 胰腺癌恶病质萎缩肌肉中线粒体自噬激活,体外抑制线粒体自噬可有效减缓肿瘤诱导的肌管萎缩.