摘要目的 探究瑞马唑仑通过间隙蛋白43(connexin-43,CX43)调控铁死亡减轻小鼠肠缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)损伤.方法 利用分子对接技术预测瑞马唑仑与CX43蛋白的结合亲和力.采用SPF级健康成年雄性C57BL/6J小鼠72只,6～8周龄,体质量20～25 g.实验一,采用随机数字表法将30只小鼠分为(n=6):假手术组(S组)、I/R组(I/R1组)、I/R+瑞马唑仑10 mg/kg组(RM10组)、I/R+瑞马唑仑20 mg/kg组(RM20组)、I/R+瑞马唑仑40 mg/kg组(RM40组);实验二,采用随机数字表法将30只小鼠分为(n=6):I/R组(I/R2组)、Erastin组(E组)、I/R+瑞马唑仑40 mg/kg组(RM40-2组)、I/R+Fer-1组(Fer-1组)、Erastin+瑞马唑仑40 mg/kg组(ERM组);实验三,采用随机数字表法将12只小鼠分为(n=6):I/R+RM+oe-NC组(oe-NC组)和I/R+RM+oe-CX43组(oe-CX43组).Fer-1组于再灌注前1 h腹腔注射Fer-1 5 mg/kg,E组于造模前1 d腹腔注射Erastin 10 mg/kg,各剂量瑞马唑仑组、oe-NC组及oe-CX43组于造模前30 min尾静脉注射瑞马唑仑,oe-NC组和oe-CX43组分别于给瑞马唑仑前48 h尾静脉注射空载载体病毒及过表达CX43载体病毒.采用夹闭肠系膜上动脉45 min再灌注30 min的方法构建小鼠肠I/R损伤模型.光镜下观察小肠组织病理学变化并行Chiu's评分评估肠黏膜损伤程度;比色法检测Fe2+、总铁、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量;DHE探针测定活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;RT-qPCR检测铁死亡相关基因表达;Western blot法检测CX43、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)的表达水平.结果 分子对接结果表明,瑞马唑仑与CX43蛋白结合能为-6.699 kcal/mol.与S组相比,I/R1组Chiu's评分升高,CX43表达上调(P<0.05),Fe2+、总铁、ROS、MDA含量升高(P<0.05),GPX4和SLC7A11表达下调(P<0.05),肠道组织学损伤程度加重.与I/R组相比,RM40组Chiu's评分降低;RM40组和Fer-1组CX43表达均显著下调(P<0.05),Fe2?、总铁、ROS和MDA含量降低(P<0.05),GPX4和SLC7A11表达上调(P<0.05),肠道组织学损伤程度减轻.与E组相比,ERM组CX43表达下调(P<0.05),Fe2+、总铁、ROS、MDA含量降低(P<0.05),GPX4和SLC7A11表达上调(P<0.05),肠道组织学损伤程度减轻.与oe-NC组相比,oe-CX43组CX43表达上调(P<0.05),Fe2+、总铁、ROS、MDA含量升高(P<0.05),GPX4和SLC7A11表达下调(P<0.05),肠道组织学损伤程度加重.结论 瑞马唑仑通过下调CX43表达抑制铁死亡减轻肠I/R损伤.