Piezo2介导模拟直升机低频振动致腰痛大鼠的机械性痛觉超敏
Piezo2 mediates mechanical allodynia in rats with low back pain induced by simulated helicopter low-frequency vibration
摘要目的 探究机械敏感离子通道Piezo2在模拟直升机低频振动诱导大鼠腰痛和机械性痛觉超敏中的作用和机制.方法 采用三维六自由度的低频振动(low-frequency vibration,LFV)诱导坐姿大鼠腰痛模型.将24只8周龄雄性SD大鼠用随机数字表法分为对照(Ctrl)组和低频振动(LFV)组.在多裂肌损伤评估基础上,von Frey实验检测疼痛敏感性,旷场实验评估自主活动和焦虑水平,ELISA、Western blot及免疫荧光检测神经生长因子(nerve growth factor,NGF)、TrkA及下游分子Piezo2的表达.原代培养SD大鼠背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)神经元,经免疫荧光鉴定后设置Ctrl组、LFV组和LFV+D-G4(D-GsMTx4,Piezo2抑制剂)组,以Western blot检测Piezo2的表达,结合钙离子荧光探针检测细胞内Ca2+水平.使用NGF(50 ng/mL)预处理神经元1 h,设置LFV组、LFV+NGF组和LFV+NGF+D-G4组,利用钙离子荧光探针观察胞内Ca2+变化.结果 LFV组大鼠多裂肌形态异常并伴有炎性细胞浸润,行为学结果显示,其缩足反射阈值降低(P<0.05),旷场总活动时间、中心区域活动时间和中心区域路程减少(P<0.05),总静止时间、周围区域静止时间以及周围区域路程增加(P<0.05),DRG组织Piezo2、NGF和TrkA 表达增加(P<0.05);细胞实验显示,与Ctrl组相比,LFV组神经元Piezo2表达增加(P<0.05),细胞内Ca2+水平明显升高(P<0.05).与LFV组相比,LFV+NGF组Ca2+水平升高(P<0.05),使用D-G4后,NGF对Piezo2的敏化作用被逆转(P<0.05).结论 持续低频振动通过NGF-TrkA/Piezo2通路诱导大鼠腰痛和机械性痛觉超敏.
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