摘要目的 初步探究限时进食(time-restricted feeding,TRF)通过影响再生胰岛衍生蛋白3γ(regenerating islet-derived protein 3 gamma,Reg3γ)与肠道菌群缓解小鼠结肠炎的机制.方法 将6周龄SPF级C57BL/6小鼠按体质量分层后随机分为(n=7):自由饮食(ad libitum feeding,AL)组与TRF组,分别给予全时段自由摄食和每天仅在00:00-08:00进食,持续4周;于第4周通过喂养2.5%葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulfate,DSS)溶液6 d诱导结肠炎.通过监测疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、结肠长度、HE染色及病理评分并结合结肠组织中胰岛再生基因3γ(regenerating islet-derived 3 gamma,Reg3g)和炎症因子mRNA表达等指标,综合评估结肠炎严重程度及TRF的干预效果.另将6周龄C57BL/6小鼠按体质量分层后随机分为(n=7):AL+抗生素鸡尾酒(antibiotic cocktail,ABX)组与TRF+ABX组.ABX混合液用于耗竭肠道菌群,以评估TRF缓解结肠炎的菌群依赖性.收集AL与TRF组小鼠粪便样本进行16S rRNA测序(16S ribosomal RNA sequencing,16S rRNA-seq),检测血清中脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)水平;并采集其结肠上皮细胞进行RNA测序(RNA sequencing,RNA-seq).结果 DSS造模后,AL组小鼠表现出体质量下降、腹泻、血便等典型结肠炎症状.TRF干预可显著缓解上述表型,自造模第4天起DAI评分低于AL组(P<0.001),结肠缩短程度减轻(P<0.01),组织结构保持相对完整,炎症明显减轻.RT-qPCR分析显示,TRF组结肠组织中Reg3g及炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)较AL组mRNA水平下调(P<0.05),抗炎因子IL-10上调(P<0.000 1).ABX处理后,AL+ABX组与TRF+ABX组在DAI评分、结肠长度及病理评分等指标上均无显著差异;TRF+ABX组较AL+ABX组仅Reg3g下调(P<0.05),而IL-1β、IL-6、TNF-α及IL-10差异无统计学意义.16S rRNA-seq分析结果表明,TRF显著重塑肠道菌群结构,革兰氏阳性菌丰度升高,革兰氏阴性菌显著减少,伴随血清LPS水平降低(P<0.001).RNA-seq进一步提示,TRF干预下活化B细胞核因子κ轻链增强子(nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB)等炎症相关信号通路富集显著受抑制.结论 TRF通过下调Reg3γ表达、重塑肠道菌群结构并降低血清LPS水平,从而抑制NF-κB炎症信号通路,减轻DSS诱导的小鼠结肠炎.