换一批报告噬菌体T6::Nluc的构建与诊断性能评估:一种快速检测大肠杆菌尿路感染的新方法
Construction of reporter phage T6::Nluc and evaluation of its diagnostic performance:A novel method for rapid detection of Escherichia coli urinary tract infections
摘要目的 构建大肠杆菌特异性的报告噬菌体T6::Nluc,并评估其在尿路感染大肠杆菌快速诊断中的性能.方法 采用CRISPR/Cas9系统联合同源重组技术,构建报告噬菌体T6::Nluc.比较T6与T6::Nluc的最佳感染复数、一步生长曲线和裂解效率等生物学特性.通过测定时间-发光曲线,确认T6::Nluc的检测限、尿液基质对检测的影响.将T6::Nluc与非大肠杆菌病原菌共培养后测定发光信号,探究检测特异性.从临床收集104株尿液分离的大肠杆菌,分析T6::Nluc的检测覆盖率.收集437例临床尿液样本进行临床检测验证.结果 T6::Nluc构建成功,其一步生长曲线、最佳感染复数与T6存在差异,但裂解效率相似.T6::Nluc可在40 min内检出≥104 CFU/mL的大肠杆菌标准菌株BL21,不受尿液基质影响,且表现出高度的检测特异性,可检出104株临床尿液大肠杆菌分离株中的51株(49.04%),在临床尿液样本中的检测灵敏度为48.84%,特异度为100.00.结论 成功构建了报告噬菌体T6::Nluc,并且可以灵敏、特异地检出尿路感染大肠杆菌,显著缩短了检测时间,有效提升了检测效率与准确性.
更多相关知识
关键词
报告噬菌体大肠杆菌尿路感染CRISPR/Cas9病原菌检测reporter phageEscherichia coliurinary tract infectionsCRISPR/Cas9pathogen detection
栏目名称
DOI
10.16016/j.2097-0927.202510022
发布时间
2026-02-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
- 浏览5
- 被引0
- 下载1
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
