摘要目的 探究利用MHC-I类分子人源化小鼠(AAD小鼠)和表达恶性疟原虫(Plasmodium falciparum,Pf)环子孢子蛋白(circumsporozoite protein,CSP)的转基因伯氏疟原虫虫株(Pb-PfCSP)建立并评估PfCSP疫苗效果评价模型.方法 采用尾静脉定量攻击不同剂量(200、500、1 000条)Pb-PfCSP子孢子与野生疟原虫(P.berghei,Pb)子孢子,观察其能否感染两种不同小鼠(C57BL/6J和AAD小鼠,6～8周龄,体质量为20～35 g),每组4只.同时通过检测AAD与C57BL/6J小鼠原虫血症出现时间及原虫率变化情况,比较两种小鼠分别对Pb和Pb-PfCSP的易感性.采用流式细胞术比较分析两种小鼠肝脏的主要免疫细胞频率与数量,初步探讨两种小鼠对不同疟原虫易感性差异的可能机制.采用硝喹(CI-679)减毒Pb-PfCSP子孢子疫苗和自主设计的PfCSP@LNP mRNA疫苗各免疫AAD小鼠作为免疫组小鼠(每组4只),并以未免疫的AAD小鼠作为对照组(每组4只),免疫完成后使用Pb-PfCSP子孢子攻击免疫小鼠,观察免疫保护效果,并通过流式细胞术检测CSP特异性组织驻留记忆性T细胞(tissue resident memory T cell,Trm)的频率与数量,采用ELISA检测CSP特异性抗体滴度,观察该疫苗能否有效诱导CSP特异性的抗体和Trm细胞的免疫应答.结果 不同剂量Pb-PfCSP都能成功感染AAD和C57BL/6J小鼠,与C57BL/6J小鼠相比,AAD小鼠更易感染Pb和Pb-PfCSP,其易感性表现为红内期出现时间更早,在感染中期原虫血症更高(P<0.05);并且无论感染与否,AAD小鼠肝脏的NKT细胞频率与数量均显著少于C57BL/6J小鼠(P<0.05),这可能是AAD小鼠更易感染疟原虫的原因之一.PfCSP@LNP mRNA疫苗免疫AAD小鼠后,采用Pb-PfCSP子孢子攻击免疫小鼠后的红内期出现时间延后于对照组小鼠,血清中能检测到较高滴度的CSP特异性抗体,但在肝脏中未能检测到PfCSP特异性Trm.同样采用硝喹减毒Pb-PfCSP子孢子疫苗免疫AAD小鼠,其免疫组的保护效果也只有16.6%,且未能检测到PfCSP特异性Trm.结论 AAD小鼠感染Pb-PfCSP虫株模型可用于评价PfCSP疫苗诱导产生PfCSP特异性抗体的效果,但用于评价疫苗诱导产生PfCSP特异性CD8+T细胞应答方面该小鼠模型有待于进一步优化.