新西兰兔骨髓基质细胞构建组织工程膀胱的实验研究

Marrow stromal cells application: Reconstruction of the bladder of New zealand white rabbits by tissue engineering techniques

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摘要目的: 研究骨髓基质细胞(MSCs)在兔组织工程膀胱中的应用.方法:按文献改进方法制作膀胱无细胞基质(BAMG),从兔胫骨中分离出MSCs,体外扩增后接种于BAMG外表面,在低糖DMEM(LG-DMEM)培养12 h,与BAMG复合成组织工程膀胱,对同一兔实施膀胱次全切术,用组织工程膀胱替代.20只兔实施了保留三角区的膀胱次全切术.实验随机分为3组.A组6只直接缝闭三角区;B组7只用膀胱形状的BAMG进行重建;C组7只用复合自体MSCs的组织工程膀胱进行替代手术.术前术后分别记录膀胱测压和放射线造影资料.12 wk时无痛处死动物,进行大体解剖和组织染色分析.结果: 体外扩增时间平均为21 d.A,B和C组膀胱容积分别为术前的22%, 85%和95%,顺应性分别为术前的11%, 104%和107%.大体解剖显示A组仅有很小的储水能力,而B,C组具有正常膀胱形态,组织染色分析A,B组显示上皮层正常,粘膜下纤维组织增生而肌层较薄;C组则显示了与自体膀胱相似的正常的3层组织结构.结论: 膀胱次全切除后原位缝合膀胱容积和顺应性均不能恢复,单纯应用BAMG膀胱容积和顺应性能够恢复正常,但逼尿肌层较薄,应用BAMG复合自体ASCs或MSCs的组织工程膀胱替代,术后12 wk膀胱容积和顺应性能够恢复正常,膀胱壁组织结构与正常膀胱相似.提示膀胱次全切除后应用BAMG复合自体MSCs的组织工程膀胱替代可以获得良好功能和组织结构.