换一批
换一批GST-Gankyrin融合蛋白的原核表达及抗体制备
Expression of Gankyrin-GST fusion protein in E. coli and preparation of its specific polyclonal antibody
摘要目的:为进一步研究在肝癌上过表达的癌相关基因Gankyrin的功能,进行GST-Gankyrin融合蛋白表达载体的构建、原核表达、及抗体制备.方法:采用逆转录PCR(RT-PCR)法从人肝癌细胞系hepG2中扩增Gankyrin Cdna编码区,并将其重组于谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合蛋白表达质粒Pgex-4T2中,经酶切、序列鉴定分析后,用该重组质粒转化大肠杆菌DH-5α,经IPTG诱导获得表达,并将Gankyrin蛋白免疫家兔,经过Western blot检测抗Gankyrin抗体的产生.结果:成功构建了Gankyrin原核表达载体,并在大肠杆菌DH-5α中获得表达,Western blot检测证实获得了抗Gankyrin抗体.结论:成功表达了Gankyrin蛋白并制备了其特异性抗体.
更多相关知识
栏目名称
基础医学
DOI
10.3321/j.issn:1000-2790.2005.11.002
发布时间
2005-07-14
- 浏览275
- 被引5
- 下载8
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
