几种克服昆明小鼠2一细胞胚胎发育阻滞的培养液研究

SEVERAL MODIFIED CULTURE MEDIA CAN SUPPORT THE EMBRYOS OVERCOMING THE 2-CELL BLOCK AND DEVELOPING TO BLASTOCYST STAGE IN KUNMING MOUSE

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摘要比较了几种培养液对克服昆明小鼠胚胎2-细胞发育阻滞的效果。实验1的结果表明，在M16及CZB培养液基础上，加减几种成分得到的改进M16培养液(用mMl6表示)和改进的CZB培养液(用mCZB表示)均能有效克服2-细胞阻滞现象。除去M16和CZB培养液中的葡萄糖和磷酸盐后添加5.55mmol/L(1g/L)果糖、2.5mmol/L牛磺酸、100或110μmol/L EDTA、2mmol/L谷氨酰胺和2％必需氨基酸(EAA)及1％非必需氨基酸(NEA)，均可支持体外培养的昆明小鼠1-细胞胚胎发育到囊胚和孵化囊胚阶段。实验结果同时证明，TE培养液也具有良好的培养效果。1-细胞胚胎在mM16、TE和mCZB中培养后发育到囊胚的比率分别为85％、85％和68％。实验2的结果表明，在M16培养液中单独添加2.5mmol/L的牛磺酸也可支持体外培养的昆明小鼠1-细胞胚胎发育到囊胚。在M16中同时添加2.5mmol/L牛磺酸和100μmol/L EDTA两种成分可使1-细胞胚胎的囊胚发育率达到67％。通过比较分析我们认为牛磺酸对克服昆明小鼠胚胎2-细胞阻滞起关键作用，而EDTA具有很好的协同作用。