隆线溞孤雌溞和两性雌溞的蛋白质差异表达
Differential protein expression between parthenogenetic and sexual female of Daphnia ( Ctenodaphnia ) carinata
摘要本实验提取隆线溞孤雌溞和两性雌溞的可溶性蛋白进行双向电泳和质谱鉴定,分析隆线溞在两种生殖状态下蛋白质组的差异变化.聚丙烯酰胺凝胶SDS-PAGE结果表明:隆线溞在两种生殖状态下存在明显的蛋白质表达差异,孤雌溞的蛋白条带在分子量约50.6 kD、36.2 kD、32.1 kD和25.7 kD处表达量较两性雌溞明显;两性雌溞的蛋白条带在分子量约87.8 kD、67.2 kD、53.6 kD和35.5kD处表达量较孤雌溞明显,其中35.5kD的蛋白条带为两性雌溞所特有.同时取两个样品的可溶性蛋白进行双向电泳,每个样品重复四次.双向电泳图谱经银染后利用软件分析可知,隆线溞孤雌溞平均可检测到约750个蛋白质点,两性雌溞平均可检测到约720个蛋白质点.同时利用软件对凝胶上的蛋白质点进行半定量分析,发现隆线溞从孤雌生殖转化为两性生殖后有18个蛋白质点呈现显著变化,其中14个点表达量明显下降,4个点表达量显著升高.实验结果具有较好的重复性.取4个表达量显著上升的蛋白质点进行质谱分析,得到两个蛋白质点(16号和17号)的测定结果.其中16号点为一类酸性脱氢酶(2I234),它在动物生长发育的各个阶段大量表达,这类蛋白质在隆线溞生殖转化过程中表达量变化尤为显著.本研究结果表明:隆线溞在孤雌生殖和两性生殖状态下存在明显的蛋白质表达差异.
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