家蚕丝蛋白Fhx/P25基因启动子区域的克隆及序列分析
Cloning and Analysis of Fhx/P25 Gene Promoter of Bombyx mori Fibroin Protein
摘要为研究家蚕Fhx/P25基因在时空上的调控机制,通过PCR扩增获得家蚕丝素蛋白Fhx/P25基因的启动子序列并进行克隆和序列分析.进一步构建了由Fhx/P25启动子驱动报告基因DsRed的表达载体pSK-P25-DsRed-PolyA,并通过家蚕BmN细胞进行瞬时表达.结果显示:Fhx/P25基因的启动子序列符合真核生物启动子特点,具有丝腺特异性表达启动子的特征,TATA框的保守序列为TATAA,位于-28--32处,CAAT基序有3个,其中-110--117和-90--87处的2个CAAT基序可能具有活性;二级结构分析显示:Fhx/P25启动子区域具有复杂的茎环结构,这可能与蛋白表达的组织特异性、时间性以及活性有关.基因启动子可以驱动红色荧光基因DsRed在家蚕BmN培养细胞中的瞬时表达.
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