换一批
换一批摘要MicroRNAs(miRNAs)是一类约20～25 nt的小分子核苷酸,在细胞内的多种生物学过程,如细胞增殖、凋亡、生长、分化和代谢等过程中具有重要的功能.已知miR-27在脂肪细胞和肌肉细胞的发育过程中起了重要作用,其在神经细胞中的表达调节至今仍不清楚.在本研究中,通过miRBase和TargetScan数据库分析了miR-27的靶基因,构建了miR-27的真核表达载体,改造了萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶报告载体,将miR-27的靶基因Bmil的3'-UTR融合到报告载体中,转染神经胶质瘤细胞,利用双荧光素酶检测系统分析荧光素酶的活性.研究发现miR-27a和miR-27b共同的靶基因主要调节发育过程.MiR-27真核表达载体能产生成熟态的miR-27.MiR-27a、miR-27b或miR-27a和miR-27b联合与Bmil 的3'-UTR的正义序列共转染U343细胞能明显降低萤火虫荧光素酶的活性(分别P<0.05,P<0.05,P<0.01),这提示了Bmil可能为miR-27的靶基因.
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