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TaqMan(R) RT-PCR对水疱性口炎病毒的鉴定检测

TaqMan(R) RT-PCR for the Detection and Differentiation of Indiana and New Jersey strains of vesicular stomatitis virus

摘要水疱性口炎分为印第安那型(Indiana)和新泽西型(New Jersey).这两种血清型病毒的快速和可靠的鉴别对该病的诊断、检疫、分子流行病学调查和监测至关重要.文章按照VSV核蛋白基因序列,设计了一对两型通用引物和两型各自特异性探针.研究建立了VSV实时荧光定量PCR检测方法,对VSV细胞培养物、人工感染实验动物组织、血清样品,以及系列稀释的不同TCID50样品、其它相关或相似病毒进行鉴定,同时与常规PCR、病毒分离试验作了比较.TaqMan(R) RT-PCR的特异性和敏感性相当于或优于对照方法.重复性和稳定性试验证实,该方法可靠.每个试验中设立阳性、阴性对照和标准稀释度对照,使试验结果可对病毒RNA作准确定量,并可在4 h内获得结果.研究结果表明,TaqMan(R) RT-PCR方法是一种特异性强、敏感性高、快速安全的定量检测方法.因此,可以作为VSV的快速检测和定型.

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作者 花群义 [1] 徐自忠 [1] 杨云庆 [1] 董俊 [1] 杨晶焰 [1] 周晓黎 [1] 贾建军 [1] 学术成果认领
作者单位 云南出入境检验检验疫局技术中心,云南昆明,650228 [1]
分类号 S852.659.5
栏目名称 研究论文
DOI 10.3969/j.issn.1007-5038.2004.02.022
发布时间 2004-06-25
基金项目
国家科技攻关项目 云南省自然科学基金 云南省昆明市科技基金
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