换一批摘要为建立稳定有效检测miR-34c的实时荧光定量技术体系，采用茎环结构法设计了反转录引物，并通过梯度浓度及梯度温度PCR法对miR-34c的最佳退火延伸温度和模板浓度进行了确定，最后通过实时荧光定量 PCR对miR-34c进行检测。试验成功建立了精确检测miR-34c的实时荧光定量技术体系，其中miR-34c最佳退火延伸温度为62．4℃及每个实时定量反应体系中 cDN A 对应的 RN A 量最适浓度为50 ng/μL ，并得到重复性高、特异性强的检测结果。该技术体系的建立不仅为检测miR-34c提供了精准便捷的方法，而且可为设计检测其他miRN A提供技术支持。
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关键词
实时荧光定量PCRmiRNA-34c颈环退火温度模板浓度real-time qPCRmiRNA-34cstem-loopannealing temperaturetemplate concentration
分类号
S852.2
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2013.11.003
发布时间
2013-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
西北农林科技大学人才引进专项基金（(Z111021101)）
国家高技术研究发展计划(863计划)（(2011AA10A208)）
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