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以 Balb／c 小鼠为动物模型的 PCV-2疫苗效力检验方法的建立

Establishment of Test Method of Porcine Circovirus Type 2 Vaccine Potency in Animal Model of Balb/c Mice

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摘要为建立以Balb／c小鼠为动物模型的 PCV-2疫苗免疫效力检验方法，选取4周龄 SPF级雌性Balb／c 小鼠20只，随机分成4组（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组），每组5只，Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别背部皮下1点，背部皮下2点和背部皮下、腿部肌肉2点接种 PCV-2疫苗0．1、0．2、0．2 mL／只，Ⅳ组空白对照组不接种；各免疫组分别于首免疫后7、14、21 d 加强免疫一次，免疫后7、10、14、21、28、35、42 d 采血分离血清，用 ELISA 方法测定PCV-2特异性抗体，确定最佳免疫途径和免疫剂量。另选取4周龄 SPF 级雌性 Balb／c 小鼠，随机分成免疫组、攻毒对照组和健康对照组，免疫组和攻毒对照组于二免后14 d 用 PCV-2强毒株进行攻毒，比较各试验组小鼠在临床症状、病理变化、相对日增重、PCV-2核酸载量等方面差异性，确定小鼠动物模型检测指标。抗体测定表明，一免背部皮下、腿部肌肉2点免疫0．2 mL／只，间隔21 d 加强免疫为最佳免疫程序，免疫后35 d 抗体水平达到峰值，显著高于Ⅰ和Ⅱ组。对照组小鼠免疫攻毒后出现消瘦、被毛凌乱、精神紧张等临床症状，淋巴结肿胀、出血、肺脏出血等病理变化，相对日增重显著降低，PCV-2核酸载量差异在103以上等临床变化。本研究以 Balb／c 小鼠为动物模型建立了 PCV-2疫苗免疫效力检验方法，优化了小鼠免疫途径及剂量，确定了相应的检测指标及技术参数，为 PCV-2疫苗免疫效力检验奠定了基础。