换一批
换一批Ⅰ型牛疱疹病毒VP22蛋白原核表达及多克隆抗体制备
Prokaryotic Expression and Preparation of Polyclonal Antibodies against BHV-1 VP22
摘要为制备Ⅰ型牛疱疹病毒(BHV-1)VP22蛋白抗体,选用国内分离株BHV-SHJS,在其UL49基因核酸序列第517至747位间设计引物扩增目的片段,构建pET-28a-UL49(172-249 aa)原核表达载体,转化载体至BL21(DE3)感受态细胞;经IPTG诱导表达并纯化VP22(172-249 aa)融合蛋白后;用该融合蛋白作抗原,以皮下注射的方式免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体;经间接ELISA、Western blot及间接免疫荧光(IFA)方法检测其灵敏度和特异性.结果表明,表达的VP22蛋白以包涵体形式存在;ELISA测定结果显示,制备的VP22蛋白抗体效价达到1:16000;Western blot和IFA结果显示,制备的多克隆抗体能与BHV-SHJS VP22特异性结合,具有良好的反应原性.试验结果为后期BHV-1感染宿主细胞在机制方面的研究和VP22功能的探究奠定了基础.
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栏目名称
研究论文
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2023.11.005
发布时间
2023-12-12
基金项目
国家自然科学基金
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