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不同注射剂量9型腺相关病毒载体在小鼠脑和脊髓表达效果分析

Analysis of Expression Effects of Different Injection Volumes of Adeno-associated Virus Type 9 Vector in Brain and Spinal Cord of Mice

摘要腺相关病毒(AAV),尤其是从轴突末端转移到神经元的AAV9型,是研究神经环路和解析大脑功能的有力工具.利用囊泡型谷氨酸神经元(VGlut2)基因敲入小鼠联合脑立体定向注射,通过将AAV9-DIO-ChR2-EGFP病毒注射于VGlut2转基因小鼠的蓝斑核(LC),探究不同注射剂量对病毒侵染范围和小鼠体重的影响.结果表明,与高注射量(1 μL)相比,低注射量(0.5 μL)可将AAV9-DIO-ChR2-EGFP限定至蓝斑核(LC).在AAV9-DIO-ChR2-EGFP注射3周后,侵染范围由LC延伸至初级运动皮质(primary motor cortex,M1)、下丘脑、中缝苍白核(araphe pallidus nucleus,Rpa)和颈髓(cervical spinal cord,CSC).随后检测 了 低注射量的 AAV 9(0.5 μL)是否影响小鼠体重,统计结果表明,0.5μLAAV9注射对小鼠体重无影响(P=0.979 5).结果表明,低注射量(0.5 μL)可以在一定程度上限制AAV的表达范围,并且脑内注射AAV9不会改变小鼠体重.

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