鸡毒支原体TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立

Establishment of Taq Man Real-time Fluorescent Quantitative PCR Detection Methods for Mycoplasma gallisepticum

二维码有效期 120s

摘要为快速检测鸡毒支原体,根据鸡毒支原体的保守基因设计特异性引物和Taq Man探针,建立鸡毒支原体Taq Man实时荧光定量PCR方法并分析鸡毒支原体培养过程中颜色单位改变法(color change unit,CCU)和荧光定量PCR检测的相关性.结果显示,标准曲线y=-3.646z+44.208,相关系数R2=0.998,最低检测限度为1 copy/μL;与其他菌株等均无交叉反应;组内和组间变异系数均小于3％,表明该方法具有良好的稳定性和可重复性.用建立的实时荧光定量PCR检测方法对26份临床样品进行检测,该方法较普通PCR方法检出率更高.建立的荧光定量PCR与CCU显示鸡毒支原体在对数生长期时,两者具有一定的对应关系.表明建立了鸡毒支原体Taq Man探针实时荧光定量PCR检测方法,可实现对鸡毒支原体的快速检测,为鸡毒支原体感染的防控提供技术基础.

作者孙宇 ^[1] 苗立中 ^[2] 程立坤 ^[3] 赵家磊 ^[4] 赵修报 ^[3] 沈志强 ^[2] 王敬茹 ^[5] 李书光 ^[2] 余燕 ^[6] 学术成果认领

作者单位山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州 256600;河南科技学院动物科技学院,河南新乡 453003 ^[1] 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州 256600;山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600 ^[2] 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东滨州 256600 ^[3] 山东绿都生物科技有限公司,山东滨州 256600 ^[4] 滨城区畜牧兽医服务中心,山东滨州 256600 ^[5] 河南科技学院动物科技学院,河南新乡 453003 ^[6]

关键词鸡毒支原体 TaqMan探针荧光定量PCR Mycoplasma gallisepticum TaqMan probe real-time quantitative PCR

分类号 S852.62 S858.31

栏目名称

研究论文

DOI 10.3969/j.issn.1007-5038.2024.04.011

发布时间 2024-05-28

基金项目

国家重点研发计划（2023YFE0106100）；山东省家禽产业技术体系滨州综合试验站项目（SDAIT-11-16）