大肠埃希氏菌诱导小鼠乳腺纤维化模型中瘦素及其受体、MMPs和TIMPs表达的研究
Study on the Expressions of Leptin and Leptin Receptor,MMPs and TIMPs in Mouse Mammary Gland Fibrosis Model Induced by Escherichia coli
摘要为探究Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2对小鼠乳腺组织纤维化的作用,用奶牛乳腺炎大肠埃希氏菌感染小鼠乳腺后,分别于感染后1、3、7、14、21 d采集小鼠乳腺组织,应用免疫组化染色检测Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2在小鼠乳腺组织细胞中的表达与分布,应用qPCR、Western blot 方法检测小鼠乳腺组织中 Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9、TIMP-1 和 TIMP-2 mRNA转录水平和蛋白表达水平.结果显示,小鼠感染E.coli前期(1~7 d),Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2主要在上皮细胞,炎性细胞中表达,感染后期(14~21 d)主要在上皮细胞、成纤维细胞和炎性细胞中表达.qPCR检测mRNA转录水平,E.coli感染1~14 d,Leptin、Ob-R、MMP-2和MMP-9的转录水平均显著上升,TIMP-2的mRNA转录水平极显著下降,感染后期(14~21 d)Leptin、Ob-R、MMP-2、TIMP-1和TIMP-2的mRNA转录水平与空白组相比无显著性差异,MMP-9mRNA转录水平极显著上升.Western blot检测蛋白表达水平,E.coli感染后1~14 d,Leptin、MMP-2、TIMP-1整体蛋白表达水平上升,TIMP-2蛋白表达水平下降,Ob-R在感染后7~14 d显著上升,MMP-9在3 d和14 d显著上升,感染后14~21 d,Ob-R、MMP-2、MMP-9呈上升趋势,Leptin呈下降趋势,TIMP-1、TIMP-2与对照组的蛋白表达水平基本持平.研究表明,通过E.coli建立的小鼠乳腺纤维化模型,能够刺激Leptin、Ob-R、MMP-2、MMP-9和TIMP-1表达,抑制TIMP-2表达.初步探究了乳腺纤维化与Leptin及其受体、MMPs和TIMPs的关系,为进一步探索纤维化的分子作用机理奠定了基础.
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