换一批置换弱毒C株非编码区的嵌合猪瘟病毒对猪的致病性研究
Pathogenicity to Pigs of a Chimeric Classical Swine Fever Virus with Substitution of the Untranslated Regions from C-strain
摘要猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种高度接触性传染病.研究表明,CSFV的非编码区(UTR)与病毒复制和毒力相关.为了分析置换CSFV弱毒疫苗C株UTR的嵌合毒株对病毒复制和猪致病性的影响,以构建的C株和QZ14(CSFV 2.1 d型毒株)感染性克隆质粒pA-C和pA-QZ14为基础,扩增pA-C的UTR区和pA-QZ14除UTR以外的基因组序列,利用同源重组技术构建重组质粒pA-QZ14-CUTR;将体外转录的病毒基因组RNA转染PK-15细胞,连续传代以拯救嵌合病毒株QZ14-CUTR;将其接种PK-15细胞,通过免疫荧光和测序鉴定以确定拯救是否成功;RT-qPCR和毒价滴定法测定病毒生长趋势,分析其细胞适应性;将嵌合病毒以1×105 TCID50剂量肌肉接种试验猪以观察其致病性.结果表明,QZ14-CUTR拯救成功,基因组中稳定携带C株UTR序列;生长曲线显示,QZ14-CUTR病毒基因组拷贝数和滴度均低于亲本毒株QZ14;相较于QZ14株,QZ14-CUTR仅引起猪轻微的临床症状,不显著影响猪白细胞和淋巴细胞数;病理变化程度、排毒阳性率和组织中的病毒核酸阳性率均低于QZ14株;QZ14-CUTR能诱导特异性CSFV E2抗体,且抗体水平持续上升.综上所述,CSFV流行毒株QZ14的UTR被弱毒C株UTR置换后,其在PK-15细胞中的复制能力有所下降,对猪的致病力降低.
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分类号
S852.65
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2024.12.001
发布时间
2024-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
浙江省重点研发计划项目（2021C0251）
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