耐热选育对新城疫LaSota疫苗株热稳定性的影响

Effect of Heat-Resistant Breeding on Thermal Stability of LaSota Vaccine Strain of Newcastle Disease Virus

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摘要为了探究新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota疫苗株热稳定性相关的潜在氨基酸位点,将其在SPF鸡胚中自然传代、间隔耐热选育和连续耐热选育至20代,监测血凝活性和细胞感染力的热稳定性;对不同代次的病毒进行全基因组测序,筛选传代过程中的突变位点,并利用蛋白结构生物学方法分析突变位点在病毒蛋白结构热稳定性中的作用.结果显示,经过间隔耐热选育和连续耐热选育的病毒血凝活性和细胞感染力热稳定性均有所提升.测序结果分析表明,与自然传代毒株相比,间隔耐热选育和连续耐热选育病毒分别共计有11和12个碱基突变,其中5个为错义突变(间隔耐热选育病毒为4个),NP蛋白Q169K(仅发生在连续耐热选育病毒)、HN蛋白G171S和 V191I、M 蛋白E170D以及L蛋白E1612K.蛋白结构分析结果显示,L蛋白E1612K的突变导蛋白二级结构改变;HN蛋白G171S的突变导致蛋白三级结构改变.通过耐热选育筛选出了5个可能与NDV LaSota疫苗株热稳定性相关的关键氨基酸位点,为NDV的耐热机理研究及ND耐热疫苗的研发提供理论支撑.

作者赵庆庆 ^[1] 曾哲 ^[2] 肖倩妮 ^[1] 李丽 ^[2] 冯贺龙 ^[2] 姚伦 ^[2] 罗青平 ^[3] 温国元 ^[2] 商雨 ^[2] 学术成果认领

作者单位武汉轻工大学动物科学与营养工程学院,湖北武汉 430048;湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室&畜禽病原微生物学湖北重点实验室,湖北武汉 430064 ^[1] 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室&畜禽病原微生物学湖北重点实验室,湖北武汉 430064 ^[2] 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所,农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室&畜禽病原微生物学湖北重点实验室,湖北武汉 430064;湖北洪山实验室,湖北武汉 430070 ^[3]

关键词新城疫病毒 LaSota疫苗株耐热选育鸡胚传代热稳定性 Newcastle disease virus LaSota strain Heat resistant breeding Passage with chicken embryos Thermal stability

分类号 S852.659.95

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研究论文

DOI 10.3969/j.issn.1007-5038.2025.02.006

发布时间 2025-03-12

基金项目

湖北省重点研发计划项目（2023BBB034）；国家自然科学基金（U23A20239）；国家自然科学基金（32302869）；现代农业产业技术体系（CARS-41）；武汉市创新专项（2022020801010337）