摘要从西北农林科技大学西安教学动物医院某病猫采集眼鼻口分泌物,PCR初步鉴定为猫疱疹病毒1型(FHV-1)与猫杯状病毒(FCV)混合感染.利用血清中和试验,将处理的样品与实验室前期制备的FCV兔阳性血清孵育后接种于猫肾细胞(CRFK)进行FHV-1的分离,连续传代3次.通过荧光定量PCR、病毒形态学、生长动力学、同源性分析以及遗传进化分析等试验,对分离毒株进行鉴定.结果显示,用FCV阳性血清中和后的样品荧光定量PCR检测结果为FHV-1阳性,FCV阴性;将血清中和后的病毒液接种CRFK细胞出现圆缩、脱落、成葡萄串样聚集等细胞病变;表明分离到FHV-1临床株,并将其命名为F2023SX1;经氯化铯密度梯度离心得到纯化的FHV-1病毒粒子,透射电镜下可观察到球形、有囊膜、结构清晰、直径约150~200 nm的病毒粒子,符合FHV-1形态特征.病毒生长动力曲线测定显示,分离株感染细胞后,上清中病毒滴度呈现先上升后下降最后趋于平稳的趋势,病毒滴度在接种48 h时最高.采用PCR扩增分离株的gD基因,经序列比对分析,与国内外FHV-1流行毒株同源性100%.论文采用分离培养结合血清中和试验成功分离到1株FHV-1.
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