换一批猪鼻支原体RAA快速检测方法的建立和初步应用
Establishment and Preliminary Application of Rapid Detection Method for Mycoplasma porcine rhinoplasma RAA
摘要为了建立一种高效、便捷的猪鼻支原体(Mhr)的新型检测方法,基于Mhr的P37基因设计了两对特异性引物,通过优化反应体系和条件,成功建立了一种Mhr的重组酶介导等温扩增技术(RAA)检测方法,对其特异性、敏感性和重复性进行评估,并使用该检测方法对共64份疑似或确诊Mhr的临床样品进行初步检测应用.结果显示,本研究建立的RAA检测方法可于24℃恒温条件下,在20 min内完成对Mhr核酸的扩增,且与Mhp、SIV、APP、HPS、PRRSV等其他猪主要呼吸道疫病病原核酸均无交叉反应,特异性好;该方法对Mhr核酸的最低检出限为1.25×10-4 copies/μL,灵敏度高;选择阳性质粒扩增3次,均有清晰条带,重复性好;应用该方法检测了 64份疑似呼吸道疫病阳性的猪鼻拭子样本,Mhr阳性率为48.43％(31/64),与本实验室已建立的Mhr及猪肺炎支原体的Taq Man双重荧光PCR方法的检测结果一致.成功建立了用于检测Mhr的RAA新型方法,该具有特异、敏感、反应快速、操作简便的特点,适合基层生产及实验室对Mhr的早期初步鉴别诊断.
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关键词
猪鼻支原体重组酶介导等温扩增技术鉴别诊断检测方法Mycoplasma suis nasalRecombinant enzyme mediated isothermal amplification techniqueDifferential diagnostic test method
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2025.10.007
发布时间
2025-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
现代农业产业技术体系（nycytxgxcxtd-2023-15-02）
南宁市科技重大专项（20232039）
广西基本科研业务费专项（23-4）
广西兽医生物技术重点实验室开放研究课题（23-035-32-B-01）
广西农业科技自筹经费项目（Z2023033）
广西农业科技自筹经费项目（Z202222）
广西农业科技自筹经费项目（Z2023034）
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