换一批同时检测致病性大肠埃希氏菌、沙门氏菌和耐药基因的微流体芯片检测方法的建立
Establishment of a Microfluidic Chip Detection Method for Simultaneously Detecting Pathogenic Escherichia coli,Salmonella and Antibiotic Resistance Genes
摘要为实现多种致病性大肠埃希氏菌、沙门氏菌和耐药基因的快速、准确检测,建立一种微流体芯片检测方法.通过筛选肠致病性大肠埃希氏菌、产肠毒素大肠埃希氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌的特异性基因作为病原鉴定基因,以喹诺酮类、氨基糖苷类、四环素类和氯霉素类4类抗菌药物的13个耐药基因作为耐药检测靶基因,针对12个病原鉴定基因和13个耐药基因,设计25对特异性引物,并在每个正向引物5′端添加通用标签序列;通过引物筛选验证、扩增程序优化、特异性试验、灵敏度试验、重复性试验和临床样品检测,建立了可同时鉴别检测多种致病性大肠埃希氏菌、沙门氏菌和耐药基因的微流体芯片检测方法.结果显示,25个目标基因与其他病原或基因之间均无交叉反应,特异性好;25个基因的检测灵敏度在0.004～40 pg/μL之间,灵敏度高;重复检测稳定性好.本研究建立的微流体芯片检测方法,可用于同时进行多种致病性大肠埃希氏菌、沙门氏菌和耐药基因的鉴别检测,具有快速、特异、敏感、稳定等优点,为临床疾病诊断和流行病学调查提供了有效途径.
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关键词
致病性大肠埃希氏菌沙门氏菌耐药基因微流体芯片Pathogenic Escherichia coliSalmonellaantibiotic resistance genemicrofluidic chip
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2025.10.012
发布时间
2025-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
北京市农业科技项目（20180123）
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