换一批基于OMPA蛋白的牛源家畜衣原体抗体间接ELISA检测方法的建立与应用
Establishment and Application of An Indirect ELISA Method for Detection of Bovine-derived Chlamydia Pecorum Antibodies Based on OMPA Protein
摘要本研究对牛源家畜衣原体(Chlamydia pecorum,C.pecorum)的ompA基因进行克隆及原核表达,以OMPA纯化蛋白作为抗原,建立间接ELISA检测方法,并对临床收集的牛血清样本进行检测.试验结果显示,重组蛋白的分子量为40 ku,Western blot鉴定OMPA的蛋白反应原性良好;ELISA检测方法中抗原包被量为6 μg/mL、血清稀释倍数为1∶25、二抗稀释倍数为1∶10 000、阴阳性判定临界阈值为0.251.用该方法检测牛冠状病毒、立克次氏体、牛传染性鼻气管炎、牛病毒性腹泻病毒阳性血清均为阴性;即使以1 024倍的稀释度对血清进行稀释,C.pecorum阳性血清仍能成功被检出;批次内与批次间的差异都未超过10％.利用所建立的实验方法对陕西省多个牛舍的768份血清样本进行临床检测,结果显示其阳性率为5.1％.本研究成功开发出一种用于测定家畜衣原体抗体的间接ELISA检测方法,可对C.pecorum的实验室诊断及流行病学分析提供技术支持.
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关键词
家畜衣原体OMPA蛋白酶联免疫吸附试验抗体检测Chlamydia pecorumOMPA proteinEnzyme-linked immunosorbent assayAntibody detection
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2025.10.013
发布时间
2025-10-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
陕西省重点研发计划重点项目（2022NY-098）
规模化肉牛场疫病防控技术项目（TG20230949）
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