换一批犬瘟热病毒YT1404D株血凝素蛋白在昆虫细胞中的表达及鉴定
Expression of Hemagglutinin of CDV YT1404D Strain in the Insect Cells and its Identification
摘要为获取具有良好抗原性且接近天然构象的犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)全长血凝素蛋白(Hemagglutinin,H),对YT1404D毒株H基因进行人工修饰,设计带有编码gp67分泌信号肽和纯化标签的GP67-H-Histag融合基因,经优化密码子后合成用于构建pFastBac-GP67-H-Histag重组质粒,将其转化至DH10 Bac感受态细胞获得重组杆粒rBacmid-GP67-H-Histag.重组杆粒转染Sf9细胞制备重组杆状病毒rBAC-rH,并纯化制备重组H融合蛋白,用 Western blot对该重组蛋白进行反应原性鉴定.结果显示,H融合蛋白分泌表达于细胞培养上清中,分子质量约70 ku,纯化后产率可达2.6 mg/100 mL.Western blot鉴定该融合蛋白分别与CDV阳性血清和疫苗株免疫鼠的阳性血清发生特异性反应,表明该融合蛋白具有良好的反应原性.为深入研究H蛋白N-糖基化差异对其免疫和反应原性的影响,开发地域流行特点的CDV亚单位疫苗奠定了基础.
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关键词
犬瘟热病毒血凝素蛋白杆状病毒-昆虫细胞表达系统分泌表达Canine distemper virusHemagglutininBaculovirus-insect cell expression systemSecretive ex-pression
分类号
S852.655
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2026.02.003
发布时间
2026-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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