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基于T3SS的沙门氏菌抑制剂筛选系统构建与多酚类化合物活性评价

Construction of a Screening System for Salmonella Inhibitors Based on T3SS and Activity Evaluation of Polyphenolic Compounds

摘要Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,T3SS)是沙门氏菌重要毒力因子,针对T3SS的特异性抑制剂是抗沙门氏菌感染的有效方法.用Red同源重组技术构建鼠伤寒沙门氏菌invA基因缺失株(SL1344ΔinvA),用无缝克隆连接构建pWSK29-sopE2-luc报告质粒,分别转化SL1344和SL1344ΔinvA获得报告菌株,以MOI=100感染复数建立鼠伤寒沙门氏菌感染HeLa细胞模型,建立T3SS抑制剂筛选系统,并筛选多酚类化合物以获得T3SS天然产物抑制剂.结果显示,成功获得SL1344ΔinvA菌株及SL1344(pWSK29-sopE2-luc)和 SL1344ΔinvA(pWSK29-sopE2-luc)报告菌株,通过 T3SS 抑制剂筛选系统,筛选获得没食子酸乙酯、没食子酸丙酯、咖啡酸、4-香豆酸和单宁酸T3SS有效抑制剂.本研究成功构建T3SS抑制剂筛选系统,为沙门氏菌抗毒力因子的药物筛选搭建平台.

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