换一批摘要为制备紫色色杆菌(Chromobacterium violaceum)自转运蛋白(Autotransporter,AT)的单克隆抗体,本研究针对紫色色杆菌CV20菌株的自转运蛋白β结构域(AT-β-domain),制备其原核表达蛋白,免疫小鼠;采用细胞融合技术制备分泌抗紫色色杆菌自转运蛋白单抗的杂交瘤细胞,通过间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞、采用Western blot和间接免疫荧光等方法鉴定单抗特异性.结果显示,成功构建了 pET-28a-AT-β-domain质粒,获得表达菌株,纯化得到的蛋白为38 ku;以此免疫小鼠后,血清抗体效价分别为1∶64 000、1∶128 000;共筛选到了 6株阳性杂交瘤细胞株,通过间接ELISA鉴定在连续传代及冻存后OD450nm无显著差异性,具有稳定性;分泌的单抗亚类为IgG1,亚型鉴定轻链均为κ链.单抗经Western blot和细菌免疫荧光鉴定,能够特异性识别纯化的原核表达蛋白和紫色色杆菌.结果表明,本研究成功制备出了抗紫色色杆菌自转运蛋白的单抗.
更多相关知识
分类号
S852.4
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-5038.2026.04.013
发布时间
2026-04-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
福建省福州市科技计划项目（2023-S-036）
福建农林大学科技创新专项基金项目（KFb22066XA）
- 浏览0
- 被引0
- 下载0
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
