换一批催乳素通过酪氨酸激酶2/信号传导及转录激活蛋白5信号通路促进奶牛乳腺上皮细胞乳铁蛋白合成和分泌
Prolactin Improve Lactoferrin Synthesis and Secretion of Bovine Mammary Epithelial Cells through Janus Kinase 2/Signal Transducer and Activator of Transcription 5 Signaling Pathway
摘要本试验旨在研究催乳素(PRL)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)中酪氨酸激酶2/信号传导及转录激活蛋白5(JAK2/STAT5)信号通路介导的乳铁蛋白(LF)合成和分泌的影响.添加不同浓度的PRL[0(对照)、10、100、1 000 ng/mL]处理BMECs 24 h,分析PRL对LF含量和LF、催乳素受体(PRLR)以及JAK2/STAT5信号通路基因表达量和相关蛋白表达的影响.为了验证STAT5在PRL促进BMECs LF合成和分泌的关键作用,添加STAT5抑制剂匹莫齐特(Pimozide)[未添加 Pimozide(对照)、10μmol/L Pimozide、100 ng/mL PRL、10 μmol/L Pimo-zide+100 ng/mL PRL]处理 BMECs 24 h,测定 PRL 和 Pimozide 对 LF 含量和 LF、JAK2/STAT5信号通路基因表达量和相关蛋白表达以及相对荧光强度的影响.结果表明:1)与对照组相比,10、100、1 000 ng/mL PRL能够显著或极显著提高BMECs上清液中的LF含量(P＜0.05或P＜0.01);Pimozide组能够极显著降低BMECs上清液中的LF含量(P＜0.01);PRL组能够极显著提高BMECs上清液中的LF含量(P＜0.01).2)与对照组相比,10 ng/mL PRL组LF、PRLR、JAK2及STAT5基因相对表达量显著升高(P＜0.05);100 ng/mL PRL组LF、PRLR、JAK2和STAT5基因相对表达量极显著升高(P＜0.01);1 000 ng/mL PRL组PRLR和STAT5基因相对表达量显著或极显著升高(P＜0.05或P＜0.01);Pimozide组LF基因相对表达量显著降低(P＜0.05);PRL组BMECs中LF基因相对表达量显著升高(P＜0.05).3)100、1 000 ng/mL PRL组BMECs中LF蛋白表达量极显著升高(P＜0.01);10、100、1 000 ng/mL PRL显著或极显著提高BMECs 中 p-JAK2/JAK2 和 p-STAT5/STAT5 表达量(P＜0.05 或 P＜0.01);Pimozide 组和 Pimo-zide+PRL组极显著降低BMECs中LF蛋白表达量(P＜0.01);PRL组极显著升高BMECs中LF蛋白表达量(P＜0.01).4)Pimozide组和Pimozide+PRL组显著或极显著降低BMECs中LF或p-STAT5的相对荧光强度(P＜0.05或P＜0.01);PRL组极显著升高BMECs中LF和p-STAT5的相对荧光强度(P＜0.01).综上所述,PRL通过JAK2/STAT5信号通路促进BMECs中LF合成和分泌.
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