摘要本试验旨在探究竹叶黄酮(BLF)对奶牛乳腺上皮细胞(BMECs)氧化损伤的缓解作用及对乳脂合成的影响.以BMECs为研究对象,进行如下操作:对照组1是将细胞接种于不添加任何物质的维持培养基中培养24 h;损伤组是将细胞接种于含800 μmol/L过氧化氢(H2O2)的维持培养基中处理8 h;对照组2是将细胞接种于含80 μg/mL BLF的维持培养基中培养24 h;保护组是将细胞接种于含80 μg/mL BLF的维持培养基中培养24 h后,更换含800 μmol/L H2O2的维持培养基中继续处理8 h.应用试剂盒检测细胞内抗氧化指标,实时荧光定量PCR方法检测细胞内抗氧化、凋亡和乳脂合成相关基因的mRNA相对表达量,免疫印迹法检测乳脂合成相关蛋白的表达量.结果显示:1)与损伤组相比,保护组细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P＜0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P＜0.05).2)与对照组1相比,损伤组细胞内活性氧(ROS)含量显著提升(P＜0.05),BLF预处理可以显著抑制受氧化损伤的细胞内ROS产生(P＜0.05).3)与损伤组相比,保护组细胞内凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)的mRNA相对表达量显著降低(P＜0.05),抗凋亡基因B淋巴细胞瘤2(Bcl2)的mRNA相对表达量显著升高(P＜0.05),抗氧化基因血红素加氧酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO1)和核转录因子E2相关因子2(Nrf2)的mRNA相对表达量显著升高(P＜0.05).4)与对照组1相比,损伤组细胞内脂滴(LDs)含量减少,保护组细胞内LDs含量有所增加;保护组细胞内甘油三酯(TGs)含量虽未恢复到正常水平,但与损伤组相比差异显著(P＜0.05).5)与损伤组相比,保护组细胞内乳脂合成相关基因乙酰辅酶A羧化酶α(ACACA)、乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)、脂肪酸结合蛋白3(FABP3)、脂肪酸合成酶(FASN)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、胆固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)和硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)的mRNA相对表达量均显著升高(P＜0.05).6)与对照组1相比,保护组细胞内乳脂合成相关蛋白ACSS2、FABP3、PPARγ和SCD的相对表达量均显著上升(P＜0.05).综上所述,BLF不仅能通过提升Nrf2及其下游抗氧化基因的表达,从而提升氧化损伤的BMECs的抗氧化能力,降低氧化应激带来的氧化损伤,而且BLF还能够有效提升乳脂相关基因和蛋白的表达,从而促进乳脂合成,有效减少氧化损伤对机体乳脂合成的影响.