摘要本试验旨在研究花椒毒酚阿拉伯糖苷(Xan)对过氧化氢(H2O2)诱导的猪肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)氧化应激损伤的影响.采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测IPEC-J2细胞活力,将IPEC-J2细胞分为对照组(Control组)、Xan组、Xan+H2O2组和H2O2组,每组3个重复.采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测IPEC-J2细胞内活性氧(ROS)含量,试剂盒检测抗氧化酶活性及炎性因子含量,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路基因mRNA相对表达量,蛋白质免疫印迹(Western bolt)检测Nrf2信号通路蛋白和凋亡蛋白相对表达量.结果表明:1)与0 μmol/L Xan组相比,10 μmol/L Xan组的IPEC-J2细胞活力无显著差异(P＞0.05);IPEC-J2细胞内ROS含量显著降低(P＜0.05),Nrf2和血红素加氧酶-1(HO-1)蛋白相对表达量显著升高(P＜0.05).因此,后续选用10 μmol/LXan处理IPEC-J2细胞.2)与Control组相比,Xan组的IPEC-J2细胞内ROS含量显著降低(P＜0.05),总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P＜0.05),Nrf2、HO-1、醌氧化还原酶1(NQO1)、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)mRNA的相对表达量显著升高(P＜0.05),HO-1蛋白相对表达量显著升高(P＜0.05).3)与Contro l组相比,H2O2组的IPEC-J2细胞中ROS含量显著升高(P＜0.05),CAT和T-SOD活性及T-AOC显著降低(P＜0.05),白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著升高(P＜0.05),Nrf2、HO-1、NQO1、CAT和SOD mRNA相对表达量显著降低(P＜0.05),Nrf2、HO-1、NQO1和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白相对表达量显著降低(P＜0.05),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量显著升高(P＜0.05).4)与H2O2组相比,Xan+H2O2组的IPEC-J2细胞中ROS含量显著降低(P＜0.05),CAT和T-SOD活性及T-AOC显著升高(P＜0.05),IL-1β 和 TNF-α 含量显著降低(P＜0.05),Nrf2、HO-1、NQO1、CAT 和 SOD mRNA相对表达量显著升高(P＜0.05),Nrf2、HO-1、NQO1和Bcl-2蛋白相对表达量显著升高(P＜0.05),iNOS、Keap1和Bax蛋白相对表达量显著降低(P＜0.05).综上所述,Xan可以通过激活IPEC-J2细胞内Nrf2信号通路,增加抗氧化酶的表达,降低ROS和炎性因子含量,从而发挥其抗氧化作用,并可以通过调节Bcl-2/Bax信号通路发挥抗细胞凋亡的作用.