换一批摘要为抑制瘤胃微生物脲酶活性,降低瘤胃氮源物质的分解浪费,本试验在毕赤酵母中诱导表达1种抗脲酶纳米抗体.以瘤胃微生物脲酶为靶标,利用毕赤酵母表达系统构建含有抗瘤胃微生物脲酶的纳米抗体重组质粒,先通过小量试表达并鉴定,随后添加甲醇对纳米抗体进行诱导表达,使用镍离子金属鳌合亲和层析柱纯化,并检测其对瘤胃微生物脲酶的抑制效果.结果显示:本试验成功构建含有抗瘤胃微生物脲酶的纳米抗体重组质粒,运用毕赤酵母表达纯化后,获得纯度高于95％的抗脲酶纳米抗体,表达量为29 mg/L培养基.体外试验表明,该纳米抗体对瘤胃微生物脲酶活性的半数抑制浓度(IC50)为35 μg/mL.综上可知,本试验在毕赤酵母中成功诱导表达了一种针对瘤胃微生物脲酶的特异性纳米抗体,该纳米抗体在体外能够显著抑制瘤胃微生物脲酶的活性.
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