换一批番茄果实特异性E8启动子的基因克隆与序列分析
Cloning and sequence analysis of tomato fruit-specific E8 promoter from Lycopersicon esculentum (Zhongshu No.5)
摘要目的获取番茄果实特异性E8启动子基因,为实现外源基因在转基因番茄中果实特异性表达做准备.方法培养中蔬5号(ZhongshuNo.5)番茄幼苗,采集叶片,用Omega公司的植物基因组提取试剂盒提取番茄基因组DNA;设计引物,从基因组中通过PCR扩增获得番茄果实特异性E81.1和E82.2启动子基因;克隆进pGEM-T载体,酶切鉴定;送上海基康公司测序;序列分析.结果从番茄基因组DNA中PCR扩增得到预期大小的启动子片段;构建重组pGEM-T-E81.1和pGEM-T-E82.2载体,经酶切证实具有与目标片段长度相符的插入片段;测序结果分析显示:番茄果实特异性E8启动子序列高度保守,所获得的ZhongshuNo.5 E82.2启动子DNA序列与Deikman报道的Cherry种的E82.2启动子同源性为99%,登陆GenBank,ID号为AF515784.结论成功获得ZhongshNo.5番茄果实特异性E81.1、E82.2启动子基因,为下一步转基因番茄口服疫苗的研制奠定了一定的工作基础.
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关键词
番茄果实特异性E8启动子基因克隆
医学主题词
番茄(Lycopersicon esculentum)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)基因(Genes)序列分析(Sequence Analysis)基因组(Genome)
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1673-4254.2003.01.007
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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