换一批丙型肝炎病毒整个开放阅读框序列的克隆及各组分蛋白的表达
Cloning of hepatitis C virus open reading frame sequence and non structural protein expressions of the virus
摘要目的在痘苗系统中表达丙型肝炎病毒(HCV)各组分蛋白.方法将编码HCV大前体蛋白的开放阅读框(ORF)序列克隆至痘苗启动子后,构建重组质粒pVHCV.重组质粒转染BHK21细胞后,再用痘苗病毒vTF7-3株感染,培养48 h后收集细胞.Western blotting和免疫荧光技术鉴定HCV非结构蛋白NS3和NS5a的表达情况.结果Westernblotting结果表明,在细胞中检测到相对分子质量为70000(NS3)和58 000(Ns5a)的两条带;免疫荧光试验结果表明,无论采用抗NS3单抗还是抗NS5a单抗,大部分转染质粒细胞的细胞质中都具有较强的荧光反应.结论HCV非结构蛋白NS3和NS5a在BHK21细胞中得到表达.
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DOI
10.3321/j.issn:1673-4254.2003.06.019
发布时间
2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划)（(2001AA215171)）
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