换一批高可溶性Aβ融合蛋白的表达、纯化和鉴定
Expression, purification and identification of Aβ fusion protein with enhanced solubility
摘要目的 在大肠杆菌中表达阿尔茨海默病(AD)相关肽段Aβ与具有强助溶作用的麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白,从而经济有效地获得具有天然免疫原性的Aβ肽段,为深入研究AD的发病机理和治疗药物提供重要的物质基础.方法 用PCR法扩增Aβ的基因片段,并将其插入到含有麦芽糖结合蛋白的融合表达载体pMAL-c2中,经测序后再将重组质粒转化人大肠杆菌TB1中进行诱导表达.经多聚麦芽糖亲和色谱的纯化获得MBP-Aβ融合蛋白.再用SDS-PAGE及Western blotting鉴定Aβ及其融合蛋白的表达和免疫原性.结果 测序结果 证实插入的DNA片段与Aβ序列一致.SDS-PAGE电泳显示Aβ融合蛋白被高效表达.Western blotting结果 表明Aβ及其融合蛋白可被其特异性抗体识别.结论 在大肠杆菌中高效表达了可溶性的Aβ融合蛋白并经纯化和酶解后获得了Aβ纯肽段,为AD病机理的研究及其病理模型的建立提供了物质基础.
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医学主题词
蛋白(Egg White)阿尔茨海默病(Alzheimer Disease)大肠杆菌(Escherichia coli)麦芽糖结合蛋白质类(Maltose-Binding Proteins)性(Sex)
分类号
R338（人体生理学）
栏目名称
DOI
10.12122/j.issn.1673-4254.2010.03.008
发布时间
2010-05-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30571022）
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