流式细胞技术检测线粒体通透转变孔道开放
Flow cytometric analysis for detecting mitochondrial permeability transition pore opening
摘要目的 通过白藜芦醇诱导线粒体通透过渡孔道(PTP)开放模型,介绍一种使用流式细胞技术检测线粒体PTP的新方法.方法 提取大鼠肝脏线粒体,使用荧光探针NAO(nonylacridineorange)选择性的标记单个线粒体;TMRE标记检测线粒体膜电位的变化;流式细胞仪检测线粒体的侧向散射角(SSC)改变来反映白藜芦醇诱导的线粒体肿胀,即PTP的开放.结果 NAO标记线粒体结合流式细胞技术可以确定从细胞中分离线粒体的纯度;白藜芦醇处理线粒体后引起了TMRE荧光强度的降低以及SSC的减少,说明白藜芦醇可以诱导PTP开放,环孢霉素A(CsA)可以抑制白藜芦醇诱导的PTP开放.结论 流式细胞技术可以准确的检测线粒体膜电位、线粒体的肿胀程度和PTP的开放.
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