换一批
换一批表达纯化糖原合成酶激酶3β的两种方法比较
Comparison of two techniques for expression and purification of glycogen synthase kinase 3β
摘要目的 建立一套高纯度、高活性表达糖原合成酶激酶3β的技术.方法 分别采用大肠杆菌和杆状病毒昆虫细胞蛋白表达系统表达糖原合成酶激酶3β,通过His和GST标签两步纯化目的 蛋白,SDS-PAGE观察目的 蛋白的纯度,激酶反应观察目的 蛋白的活性.结果 大肠杆菌表达纯化的糖原合成酶激酶3β占纯化后总蛋白的壁为54%,昆虫细胞表达纯化的糖原合成酶激酶3p占纯化后总蛋白的量为96%;昆虫细胞来源的目的 蛋白比大肠杆菌来源的目的 蛋白活性高-倍左右.结论 相比大肠杆菌表达的糖原合成酶激酶3β,昆虫细胞表达的目的 蛋白具有更高的纯度和活性.
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主题词
糖原合成酶激酶3β(Glycogen Synthase Kinase 3 beta)大肠杆菌(Escherichia coli)昆虫(Insects)细胞(Cells)蛋白(Egg White)
分类号
R349.84
栏目名称
基础研究
DOI
10.12122/j.issn.1673-4254.2011.03.003
发布时间
2011-07-05
基金项目
国家自然科学基金
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