换一批
换一批慢病毒介导LOX-1基因RNA干扰抑制氧化应激诱导心肌细胞凋亡
Lentivirus-mediated LOX-1-RNA interference attenuates oxidative stress-induced apoptosis in myocardial cells
摘要目的 构建大鼠凝集素养氧化低密度脂蛋白受体( LOX-1) RNA干扰慢病毒表达载体并观察LOX-1在氧化应激诱导心肌细胞凋亡中的作用.方法 设计针对大鼠LOX-1的shRNA序列,将shRNA序列插入到pLentiLox3.7(pLL3.7)慢病毒载体中,构建慢病毒载体pLL3.7-LOX1.慢病毒载体及包装载体dR8.9、VSVG共转染293FT细胞包装慢病毒.慢病毒侵染H9C2大鼠心肌细胞,RT-PCR鉴定对LOX-1抑制效率,CCK-8、Hochest33258染色检测LOX-1对H2O2诱导H9C2心肌细胞凋亡的影响.结果 通过双酶切鉴定,证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确,抑制LOX-1能抑制H2O2诱导的细胞活力下降,减轻H2O2诱导的心肌细胞凋亡,与H2O2组比较均有统计学意义(P＜0.01).结论 成功构建靶向大鼠LOX-1基因RNAi慢病毒载体,LOX-1激活可能在H2O2诱导心肌细胞凋亡中发挥重要作用.
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