旋转生物反应器内微载体共培养CL-1肝细胞与人肝星形细胞
Evaluation of co-cultured CL-1 hepatocytes and hepatic stellate cells in rotatory cell culture system
摘要目的 评估CL-1肝细胞跟人肝星形细胞(HSC)的微载体微重力共培养来提高CL-1肝细胞的活力与功能的可行性.方法 实验分为两组:CL-1肝细胞微载体微重力单培养组和CL-1肝细胞、HSC微载体微重力共培养组.通过倒置显微镜观察、细胞计数、MTT染色及扫描电子显微镜比较两组肝细胞的形态、细胞活力差异,并通过、培养上清中ALT、白蛋白浓度等功能指标测定,比较两组肝细胞活力和功能差异.结果 共培养组较单培养组细胞生长迅速,细胞从24 h贴壁后开始增长,到第5天进入高峰.共培养组1~7 d的肝细胞密度明显高于单培养组的细胞密度(P<0.05).两组肝细胞ALT、白蛋白从第1天开始不断分泌增加,第5天达到峰值,第6、7天有所下降.ALT功能比较,共培养组明显低于单培养组(P<0.05).白蛋白功能比较,共培养组明显高于单培养组(P<0.05).倒置显微镜、扫描电镜及MTT均提示共培养组肝细胞形态、活力优于单培养组.结论 人肝细胞、HSC微载体微重力共培养研究有利于维持及增强旋转生物反应器的肝细胞活力及功能,对人工肝的培养模式发展具有重要意义.
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