换一批siRNA特异性沉默ADP核糖基化因子6对前列腺癌PC-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响
Small RNA interference-mediated ADP-ribosylation factor 6 silencing inhibits proliferation, migration and invasion of human prostate cancer PC-3 cells
摘要目的：研究ADP核糖基化因子6（Arf6）对雄激素非依赖性前列腺癌PC-3细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响并初步探讨其可能的分子作用机制。方法设计合成3条针对不同靶向区域的Arf6特异性siRNA序列，转染细胞后通过real-time PCR和蛋白质印迹法检测其对Arf6的干扰效果，筛选出干扰效果最佳的siRNA序列；通过噻唑盐（MTT）实验、划痕实验、及transwell细胞迁移和侵袭实验观察siRNA干扰Arf6表达对PC-3细胞增殖、迁移和侵袭的影响；蛋白质印迹法检测AKT、p-AKT、ERK1/2、p-ERK1/2和Rac1蛋白表达水平的变化。结果与空白对照组相比，转染阴性对照序列对PC-3细胞内源性Arf6的mRNA和蛋白表达水平无明显影响，3条siRNA序列均能抑制Arf6的表达，其中siRNA-3对PC-3细胞Arf6表达干扰效果最好，Arf6 mRNA和蛋白抑制率分别为（91.88±3.13）%和（86.37±0.57）%。siRNA-3干扰Arf6表达抑制PC-3细胞的增殖，且PC-3细胞体外迁移距离和侵袭细胞数较空白和阴性对照组明显减少（P<0.05）。蛋白质印迹法检测发现转染siRNA-3的PC-3细胞p-ERK1/2和Rac1表达水平明显降低，而AKT、p-AKT和ERK1/2表达水平较对照组差异无统计学意义。结论 siRNA干扰Arf6表达可显著抑制PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭能力，其分子作用机制可能与p-ERK1/2和Rac1表达下调相关。
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关键词
ADP核糖基化因子6前列腺癌侵袭迁移RNA干扰ADP-ribosylation factor 6prostate cancerinvasionmigrationRNA interference
医学主题词
核糖(Ribose)前列腺肿瘤(Prostatic Neoplasms)细胞(Cells)敏感性与特异性(Sensitivity and Specificity)细胞增殖(Cell Proliferation)
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1673-4254.2016.06.01
发布时间
2016-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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