人甲状旁腺激素（1-34）在人成骨肉瘤细胞中对基质Gla蛋白及Wnt/β-catenin信号通路的调节作用

Effect of parathyroid hormone (1-34) on expression of matrix Gla protein and Wnt/βcatenin signaling pathways in MG63 cell lines

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摘要目的：观察人甲状旁腺激素（PTH）的N端活性片段PTH（1-34）对人成骨肉瘤细胞MG63基质Gla蛋白（MGP）表达的影响，以及PTH通过Wnt/β-catenin信号通路介导MGP表达调控的作用，探讨PTH（1-34）在防治骨质疏松症作用中可能的分子机制。方法（1）用不同浓度PTH（1-34）（10-9、10-8、10-7 mol/L），单独或联合Wnt/β-catenin信号通路抑制剂DKK-1（200 ng/mL）干预MG63细胞；（2）检测碱性磷酸酶（ALP）染色及活力测定用于判断细胞分化情况；（3）MGP及Wnt/β-catenin信号通路各组分的mRNA及蛋白的表达分别采用实时定量RT-PCR及Western blotting方法。结果（1）PTH（1-34）上调MGP基因的表达， MGP mRNA的表达分别是对照组的2.56倍、4.14倍、7.81倍（P<0.05或P<0.01），且呈剂量依赖性增高；（2）PTH增强MG63细胞ALP活力，Dkk-1抑制ALP活性，Dkk-1与PTH联用部分阻断PTH上调ALP活力（P<0.05）；（3）PTH上调MGP及Wnt/β-catenin信号通路中相关因子LRP5、β-catenin、Runx2 mRNA及蛋白水平，其mRNA分别是对照组的2.65、4.01、3.48倍（P<0.05或<0.01）；DKK-1对PTH（1-34）促MGP表达没有影响，但大部分阻断了Wnt/β-catenin信号通路中相关因子的表达。结论 PTH（1-34）能明显上调MGP及Wnt/β-catenin信号通路中相关因子的表达，Wnt/β-catenin信号通路和MGP在PTH调节骨代谢中起重要作用。