手术切除的结直肠癌组织中的肿瘤干细胞的培养及鉴定

Culture and identification of tumor stem cells from surgically resected colorectal cancer tissues

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摘要目的获得结直肠癌患者手术切除癌组织的肿瘤干细胞(CSC),培养并鉴定其干细胞特性.方法通过原代培养手术切除结直肠癌组织获得结直肠癌细胞,再通过有限稀释法和无血清培养法筛选结直肠癌CSC,软琼脂集落实验检测CSC和对照组人结直肠癌细胞株SW480的增殖能力;用低数量级细胞裸鼠皮下成瘤实验,检测结直肠癌CSC和SW480的成瘤能力;并运用Western blot及免疫荧光方法,检测CSC和SW480的免疫表型.结果临床结直肠癌标本原代培养的CSC,加入血清培养可使CSC分化.软琼脂集落形成实验结果显示,原代培养的CSC克隆形成率为56.64％和54.45％,对照组人结直肠癌细胞株SW480的克隆形成率为4.41％,CSC与SW480集落形成率的差异具有统计学意义(P<0.01).裸鼠皮下成瘤实验中,原代培养的CSC皮下注射500个细胞可形成皮下瘤,而SW480皮下注射500个细胞不形成皮下瘤.CSC表达CD133、CD44,不表达CK7;SW480细胞不表达CD133、CD44,表达CK7.结论原代培养的手术切除结直肠癌组织标本获得的肿瘤细胞,再行无血清培养可形成CSC,鉴定具有CSC的自我更新及分化能力.

作者唐娜 ^[1] 周略 ^[2] 成志强 ^[3] 邓永键 ^[4] 丁彦青 ^[4] 学术成果认领

作者单位 南方科技大学第一附属医院//深圳市人民医院病理科,广东深圳518020;暨南大学第二临床医学院//深圳市人民医院病理科,广东深圳518020 ^[1] 南方科技大学第一附属医院//深圳市人民医院放疗科,广东深圳,518020 ^[2] 南方科技大学第一附属医院//深圳市人民医院病理科,广东深圳,518020 ^[3] 南方医科大学南方医院病理科,广东广州510515;南方医科大学基础医学院病理学系,广东广州510515 ^[4]

关键词肿瘤干细胞结直肠癌原代培养

主题词结直肠肿瘤(Colorectal Neoplasms)肿瘤干细胞(Neoplastic Stem Cells)细胞(Cells)组织(Tissues)肿瘤(Neoplasms)

栏目名称 临床研究

DOI 10.12122/j.issn.1673-4254.2019.04.06

发布时间 2019-06-17

基金项目

国家重点研发计划 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 深圳市科技计划项目