CEP55可能是治疗成熟阻滞型非梗阻无精子症的分子靶标
CEP55 may be a potential therapeutic target for non-obstructive azoospermia with maturation arrest
摘要目的 应用siRNA技术沉默CEP55基因表达对小鼠精原细胞增殖的影响.方法 选取2017年1月1日~12月31日在南方医科大学南方医院妇产科生殖中心就诊的无精子症男性不育症患者,根据其睾丸病理切片诊断分为成熟阻滞组和生精正常组各3名.应用核素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术,发现两组患者的睾丸组织表达差异蛋白质CEP55蛋白.设计并合成CEP55基因特异性的siRNA序列,转染小鼠精原细胞,分为空白对照组、阴性对照组及siRNA转染组,应用Western blot和qPCR检测在siRNA对CEP55的影响,CCK8实验观察siRNA抑制CEP55后对小鼠精原细胞增殖的影响.结果 通过iTRAQ核素标记结合LC/MS/MS分析,共鉴定出差异蛋白共两百多个,CEP55在基因表达水平差异最显著.Western blot结果显示,siRNA转染组CEP55蛋白的相对表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05).qPCR结果显示,siRNA转染组CEP55的mRNA表达量低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05).CCK8实验发现siRNA干扰CEP55表达后,小鼠精原细胞生长明显受到抑制(P<0.05).结论 CEP55可能在精子发生过程中起到关键作用,CEP55可能成为治疗成熟阻滞型非梗阻无精子症的分子靶标.
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