换一批
换一批环状RNA circRSF1结合HuR促进辐射诱导的肝星状细胞炎性表型
Circular RNA circRSF1 binds to HuR to promote radiation-induced inflammatory phenotype in hepatic stellate cells
摘要目的 探讨环状RNA circRSF1能否通过结合HuR蛋白并阻遏其功能发挥,进而调控辐射诱导的肝星状细胞(HSC)炎性表型.方法 在人HSC细胞株LX2过表达或敲低HuR后给予8 Gy X射线照射.通过qRT-PCR检测炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的表达,采用Western blot检测IκBα表达和NF-κB磷酸化.采用RNA pull down和RNA结合蛋白免疫沉淀(RIP)验证circRSF1与HuR的结合.改变circRSF1和HuR的作用水平后检测炎性因子和IκBα的表达以及NF-κB的磷酸化.结果 敲低HuR可明显上调受照的LX2中IL-1β、IL-6、TNF-α的表达,并减少IκBα表达和促进NF-κB磷酸化,而过表达HuR则相反(P<0.05).过表达或敲低circRSF1对HuR的表达无影响.RNA pull down和RIP实验证实了两者存在相互结合.过表达circRSF1减少HuR与IκBα结合并下调IκBα的表达(P<0.05).过表达circRSF1联合过表达HuR可部分逆转过表达circRSF1所致的LX2受照后炎性因子表达上调、IκBα表达下调以及NFκB磷酸化增加,而敲低circRSF1联合敲低HuR的效应则相反(P<0.05).结论 circRSF1通过结合HuR降低IκBα表达,促进NF-κB通路激活,从而促进辐射诱导的HSC炎性表型.
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