换一批抑制RAB27a能够抑制三阴乳腺癌细胞的增殖、侵袭和粘附
Silencing RAB27a inhibits proliferation, invasion and adhesion of triple-negative breast cancer cells
摘要目的 抑制在外泌体分泌过程中发挥核心作用的RAB27蛋白家族的表达,以探究其对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞生物学功能的影响.方法 利用荧光定量PCR和蛋白印迹法对比3株三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MDA-MB-468、Hs578T和正常乳腺上皮细胞系MCF10A的RAB27家族基因和蛋白表达以及外泌体的分泌情况;使用siRNA干扰技术分别抑制3株三阴性乳腺癌细胞中RAB27a和RAB27b的表达,并采用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测抑制效率,随后使用蛋白印迹法检测这3株三阴性乳腺癌细胞RAB27a和RAB27b分别被抑制后外泌体的分泌情况.用细胞增殖、细胞侵袭和细胞粘附实验评价RAB27a和RAB27b分别被抑制后对这3株三阴性乳腺癌细胞生物学功能造成的影响.结果 三阴性乳腺癌细胞和正常乳腺上皮细胞相比外泌体分泌更加旺盛(P<0.001),并且RAB27a和RAB27b的表达在基因和蛋白水平上均显著上升(P<0.01).分别抑制3株三阴性乳腺癌细胞RAB27a的表达后,外泌体分泌显著下调(P<0.001),抑制RAB27b的表达对外泌体分泌无显著影响.并且外泌体分泌显著下调后,与外泌体分泌未受到显著影响的三阴性乳腺癌细胞相比,癌细胞增殖能力、细胞侵袭能力和细胞粘附能力均显著下调(P<0.01).结论 在三阴性乳腺癌细胞外泌体分泌过程中起核心作用的是RAB27a,抑制RAB27a能够抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖、侵袭和粘附.
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