换一批C/EBPβ介导NPHP1敲低的肾小管上皮细胞TNF-α通路下游炎症因子的表达
C/EBPβ mediates expressions of downstream inflammatory factors of the tumor necrosis factor-α signaling pathway in renal tubular epithelial cells with NPHP1 knockdown
摘要目的 探讨NPHP1基因缺陷肾小管上皮细胞TNF-α信号通路激活及其调控的炎症因子表达.方法 使用重组慢病毒LV-NPHP1-RNAi构建敲低NPHP1表达的人近端肾小管细胞株(HK2)细胞(NPHP1KD HK2).通过实时荧光定量PCR、Western blot、酶联免疫吸附实验法检测各细胞株TNF-α表达、p38和C/EBPβ激活状态及其调控炎症因子CXCL5、CCL20、IL-1β、IL-6、MCP-1等表达情况.通过构建siRNA敲低野生型和NPHP1KD HK2细胞C/EBPβ表达,观察上述指标变化.结果 敲低NPHP1表达后,NPHP1KDHK2细胞TNF-α、C/EBPβ、CXCL5、IL-1β和IL-6的mRNA表达量增加(P<0.05);Western blotting结果显示,phospho-p38、C/EBPβ表达上调(P<0.05);培养液上清IL-6水平增加(P<0.05).使用siRNA敲低C/EBPβ表达后,NPHP1KDHK2细胞CSF2、CCL20、IL-1β和IL-6的mRNA表达水平下调(P<0.05);Western blot显示phospho-p38表达下调(P<0.05);培养液上清IL-6水平下降(P<0.001).结论 NPHP1基因缺陷的NPHP1KDHK2细胞中TNF-α信号通路被激活,其调控的下游印证因子表达上调.C/EBPβ可能是介导NPHP1KDHK2细胞TNF-α信号通路相关炎症因子表达的关键转录因子.
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栏目名称
DOI
10.12122/j.issn.1673-4254.2024.01.18
发布时间
2024-02-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省自然科学基金（2022A1515012307）
广东省自然科学基金（2020A1515010286）
北京白求恩公益基金（SCE093DS）
南方医科大学南方医院院长基金青年项目（2020C021）
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